一、高壓滅菌鍋使用前要水加到水位線；

二、將需滅菌的培養(yǎng)基、蒸餾水或其它器皿放入滅菌鍋內(nèi)，關(guān)閉鍋蓋，檢查排氣閥、安全閥狀態(tài)（上下排氣閥打開(kāi)安全閥關(guān)合然后加熱，方便空氣排出，上、下排氣閥都同時(shí)處于開(kāi)啟狀態(tài)待有水蒸汽從上、下閥溢出，此狀態(tài)保持7、8分鐘后，即排出空氣后 上排氣閥關(guān)合 下排氣閥調(diào)小 安全閥保持關(guān)合狀態(tài) ），

三、打開(kāi)電源，檢查參數(shù)設(shè)置是否正確，然后按下“work”鍵，滅菌鍋開(kāi)始工作；自動(dòng)派冷氣，到105℃時(shí)，底部排氣閥門(mén)自動(dòng)關(guān)閉，然后壓力開(kāi)始上升；

四、壓力升至 0.15MPa（121℃）時(shí)，滅菌鍋再次自動(dòng)放氣，然后開(kāi)始記時(shí)，一般培養(yǎng)基滅菌20min，蒸餾水滅菌30min；

五、達(dá)到規(guī)定的滅菌時(shí)間后，關(guān)閉電源，打開(kāi)放氣閥緩慢放氣；當(dāng)壓力指針降至 0.00MPa時(shí)，放氣閥無(wú)蒸汽排除時(shí)，方可開(kāi)啟鍋蓋。

六、注意事項(xiàng)

1、汽未放盡前，不得開(kāi)啟高壓鍋；

2、如果滅菌后的培養(yǎng)基在鍋內(nèi)不及時(shí)拿出，需在蒸汽放盡后將鍋蓋打開(kāi)，切忌將培養(yǎng)基封閉在鍋內(nèi)過(guò)夜。

3、壓力表指針在0.05MPa以上時(shí)，不能過(guò)快放汽，以防止壓力急速下降，液體滾沸，從培養(yǎng)容器中溢出。

4、操作過(guò)程，請(qǐng)注意安全，小心燙傷。

    在一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)大氣壓下水的沸點(diǎn)是100攝氏度 壓力越高,與之對(duì)應(yīng)壓力下的沸點(diǎn)越高 這里是高壓蒸汽鍋,說(shuō)明壓力肯定大于一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)大氣壓(通常情況下的地表面的大氣壓強(qiáng)就認(rèn)為是一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)大氣壓),也就是說(shuō)高壓蒸汽鍋肯定要超過(guò)100攝氏度才能沸騰,才能產(chǎn)生蒸汽. 至少要等到水煮沸，排出一分鐘左右的蒸汽后再把安全閥關(guān)閉，這樣可以使高壓蒸汽鍋里的壓力迅速上升,原來(lái)沸騰的水因?yàn)閴毫Φ目焖偕仙Ｖ狗序v,壓力大,沸點(diǎn)高,水蒸汽就變成液體水,而放出大量的汽化潛熱,就是高溫高壓的目的，從而達(dá)到殺菌的目的 原理在同一溫度下，濕熱的殺菌效力比干熱大，其原因有三：

一是濕熱中細(xì)菌菌體吸收水分，蛋白質(zhì)較易凝固，因蛋白質(zhì)含水量增加，所需凝固溫度降低，

二是濕熱的穿透力比干熱大；

三是濕熱的蒸汽有潛熱存在，每1克水在100℃時(shí)，由氣態(tài)變?yōu)橐簯B(tài)時(shí)可放出2．26kJ（千焦）的熱量。這種潛熱，能迅速提高被滅菌物體的溫度，從而增加滅菌效力。

    在使用高壓蒸汽滅菌鍋滅菌時(shí)，滅菌鍋內(nèi)冷空氣的排除是否*極為重要，因?yàn)榭諝獾呐蛎泬捍笥谒羝呐蛎泬?，所以，?dāng)水蒸汽中含有空氣時(shí)，在同一壓力下，含空氣蒸汽的溫度低于飽和蒸汽的溫度。 如果壓力未降到0時(shí)，打開(kāi)排氣閥，就會(huì)因鍋內(nèi)壓力突然下降，使容器內(nèi)的培養(yǎng)基由于內(nèi)外壓力不平衡而沖出燒瓶口或試管口，造成棉塞沾染培養(yǎng)基而發(fā)生污染。 要100度以上,也就是對(duì)應(yīng)壓力下的沸點(diǎn)后才能使水劇烈沸騰,將鍋內(nèi)空氣更多的排除.