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4-15
PCR儀的特點是靈敏度高,污染是實驗中常見的問題,只要實驗室曾經(jīng)擴增過某個片段,就有可能以后的實驗中發(fā)生污染。所以,我們在實驗前,可以用紫外燈破壞污染物。簡便快速,一次性加好反應,對標本的純度要求低。PCR儀的反應成分有模板濃度多高會導致反應的非特異行增加,不能混合其他的物質。引物濃度過高會導致模板與引物配錯,反應特性下降。使用酶量增加使反應特異性下降,如果太少,有影響產(chǎn)量。我們在試驗中,會使用高特異行的酶,測試會比較。
4-10
PCR儀的新核酸定量技術已經(jīng)廣泛使用了。作為一種核酸定量技術,它應用較多且較成熟主要是在病原體檢測方面,其*性在此也得以充分體現(xiàn)。因此將其應用于臨床具有很大潛力。在腫瘤、遺傳病研究,尤其是基因表達方面的研究,該技術應用還較少,在這方面加強研究應用,將會有廣闊的前景。將生物基因芯片技術結合,有助于PCR技術的進一步完善,推動該技術的發(fā)展、應用。
4-7
熒光定量PCR儀反應是一種新的核酸定量技術。這種技術將熒光能量傳遞技術應用于常規(guī)多聚酶鏈式反應儀中,從而進行定量檢測。即是通過受體發(fā)色團之間偶極一偶極相互作用,能量從供體發(fā)色團轉移至受體發(fā)色團,轉移效率與曲個發(fā)色團之間距離的6次冪倒數(shù)成比例?,F(xiàn)在在以前的PCR技術上得到進一步發(fā)展,大大降低了誤差率,工作效率高,結果重現(xiàn)性好,且不必使用對人體造成傷害。與普通定量PCR相比,熒光定量PCR儀具有可實時監(jiān)測、準確性高、效率高等優(yōu)點。
4-1
酶標儀的主要目的是什么,我們?yōu)槭裁匆\用它呢?我們通過計算機串口接收酶標儀接口輸出的數(shù)據(jù),并將其轉變成實際值,利用判讀公式對OD值進行判讀,zui終與相應的病員資料掛接,存入數(shù)據(jù)庫中,實現(xiàn)酶標儀數(shù)據(jù)的計算機管理。我們先用系統(tǒng)中文版編寫數(shù)據(jù)接收、數(shù)據(jù)處理、病員資料管理、查詢、報告單打印等程序模塊,并集合編譯成Windows下能獨立運行的單個可執(zhí)行文件。結果利用計算機的強大處理功能,采用全中文操作界面,具有操作簡單、數(shù)據(jù)判讀快速、檢驗數(shù)據(jù)管理規(guī)范等特點。
3-28
我們知道酶標儀的種類有好多種的,在選用的時候可能不知道該使用哪個?一般情況下,我們是這樣做的。根據(jù)工作需要去選擇。切忌刻意去求功能多,因為如果儀器功能過多,易出故障。有些功能如酶標動力學或凝集等,可能根本就用不上。如果擬購置的酶標儀主要是用于定性測定,則不必要求的定量所需的軟件系統(tǒng)。至于全自動酶免疫分析系統(tǒng)則對工作量比較大的血站或大型醫(yī)院較為適用,對于日常工作量不太大的實驗室,就無必要。第二是根據(jù)酶標儀的性能去選擇。反應酶標儀性能的指標主要有測定波長范圍,濾光片配置,檢測速度...
3-25
細胞株是用單細胞分離培養(yǎng)或通過篩選的方法,由單細胞增殖形成的細胞群。細胞株的特殊性質或標志必須在整個培養(yǎng)期間始終存在。貼壁細胞的消化法傳代:吸除瓶內舊培養(yǎng)液。以50ml培養(yǎng)瓶為例,向瓶內加入2-3ml胰蛋白酶,輕輕搖動培養(yǎng)瓶,使消化液流遍所有細胞表面。消化在37C或室溫25C以上環(huán)境下進行。消化后把培養(yǎng)瓶放置顯微鏡下進行觀察.發(fā)現(xiàn)胞質回縮、細胞間隙增大后。應立即終止消比,然后吸掉消化液后再加全培養(yǎng)液終止消化。用彎頭吸管,吸取瓶內培養(yǎng)液,反復吹打瓶壁細胞,吹打過程要順序進行,從...
3-21
不管任何的產(chǎn)品,在決定購買前,你必須了解它的屬性以及事項。那我們在選用細胞株的時候,有什么值得注意呢?細胞株的生物等級,由于有些細胞株及菌株屬于管制品,所以從國外購貨比較麻煩。在購買國外細胞株時,需交待國外加比較多的干冰(一般在13公斤以上,采用比較密封的泡沫盒加套紙箱。報關時盡量提供比較充足的證明材料,以免擔擱時間而導致干冰揮發(fā)完細胞株死亡,甚至于被退回給發(fā)貨人。還有在決定購買細胞株之前,必須仔細閱讀他們的培養(yǎng)信息。
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